電誘導(dǎo)細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)臺(tái)設(shè)計(jì)
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20世紀(jì)60年代人們注意到細(xì)胞存在著兩種不同形式的死亡方式:凋亡(apoptosis)和壞死(necrosis)。細(xì)胞壞死指病理情況下細(xì)胞的意外死亡,壞死過程細(xì)胞膜通透性增高,細(xì)胞腫脹,核碎裂,繼而溶酶體、細(xì)胞膜破壞,細(xì)胞內(nèi)容物溢出,細(xì)胞壞死常引起炎癥反應(yīng)。
細(xì)胞凋亡apoptosis一詞來源于古希臘語,意思是花瓣或樹葉凋落,意味著生命走到了盡頭,細(xì)胞到了一定時(shí)期會(huì)像樹葉那樣自然死亡。凋亡是細(xì)胞在一定生理或病理?xiàng)l件下遵守自身程序的主動(dòng)死亡過程。凋亡時(shí)細(xì)胞皺縮,表面微絨毛消失,染色質(zhì)凝集并呈新月形或塊狀靠近核膜邊緣,繼而核裂解,由細(xì)胞膜包裹著核碎片或其他細(xì)胞器形成小球狀凋亡小體凸出于細(xì)胞表面,最后凋亡小體脫落被吞噬細(xì)胞或鄰周細(xì)胞吞噬。凋亡過程中溶酶體及細(xì)胞膜保持完整,不引起炎癥反應(yīng)。細(xì)胞凋亡時(shí)的生化變化特征是核酸內(nèi)切酶被激活,染色體DNA被降解,斷裂為50~300 kb長的DNA片段,再進(jìn)一步斷裂成180~200bp整倍數(shù)的寡核苷酸片斷,在瓊脂糖凝膠電泳上呈現(xiàn)“梯狀”電泳圖譜(DNA Ladder)。細(xì)胞凋亡在個(gè)體正常發(fā)育、紫穩(wěn)態(tài)維持、免疫耐受形成、腫瘤監(jiān)控和抵御各種外界因素干擾等方面都起著關(guān)鍵性的作用。
1.細(xì)胞凋亡的檢測(cè)方法
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